利用檢眼鏡，對眼部玻璃體、視網膜、脈絡膜及視神經等眼球後部進行的檢查。視網膜動脈和靜脈是人體唯一能在活體上直接觀察的血管，視神經是腦的延長部分。眼底檢查不僅對眼部疾病的診斷與治療十分重要，也是某些全身疾病如高血壓（圖1）、糖尿病、顱內壓增高所致的視乳頭水腫（圖2）等的檢查手段，有助於估計預後和評價療效。
圖1 高血壓的眼底
圖2 視乳頭水腫
眼底檢查應盡量散瞳在暗室內進行。成年人散瞳前應排除青光眼的可能，如前房是否偏淺，眼壓是否偏高。常用的檢眼鏡有直接和間接兩種。
直接檢眼鏡檢查法 其原理是將光經一小鏡反射入被檢查之眼中，再從眼底反射出來，經眼底鏡上的小孔回至檢查者的眼中。直接檢眼鏡的構造，包括照明系統和觀察系統。燈光經棱鏡折射入被檢眼中，檢查者通過裝有可以調節屈光不正的系列鏡盤檢查眼底。被檢者坐或臥位，檢查右眼時，檢查者位於其右側，右手持鏡，以右眼觀察；檢查左眼時，則位於其左側，左手持鏡，以左眼觀察。握鏡時以拇指控制開關，食指貼著轉盤的邊緣，撥動轉盤選擇所需要的鏡片，以便看清眼底被檢查的部位。檢查時先用十號鏡（從+20D～4D）將眼前部放大，首先看到角膜、虹膜及晶狀體。然後逐漸減少十號鏡的度數，將焦點逐漸移後，經玻璃體直至視網膜。觀察視盤後，沿血管方向依次檢查顳上、顳下、鼻上及鼻下4個象限內的血管和視網膜。檢查極周邊部時，可囑被查者向相應方向轉動眼球。檢查黃斑時，可將光源自視盤向顳側移動約二個半視盤直徑距離，或囑被查眼註視光源。此鏡檢查距離近，看的范圍小，但可看到一個放大14.66倍的正位虛像。
間接檢眼鏡檢查法 所見眼底范圍大，立體感強，景深寬，可同時看到眼底不在同一平面的病變，利用鞏膜壓迫器，還可檢查極周邊的眼底。所用照明強，輕度屈光混濁與高度近視眼也能適用。此外，其工作距離遠，便於戴上此鏡在直視下做手術。在鏡兩側還有示教鏡。雙目間接檢眼鏡不僅是眼底檢查的重要工具，同時也是視網膜脫離手術、玻璃體切割手術必備的器械之一。