在操作過程中人為地排除一切微生物或一切不需要的微生物。它是微生物學的基本技術。要點是：①殺死規定作業系統（如試管、三角瓶和培養皿）中的一切微生物，使作業系統變成無菌；②在作業系統與外界的聯繫之間隔絕一切微生物穿過（如用火焰封閉三角瓶和試管等的開口，用棉花過濾空氣、用濾器過濾水等）；③在無菌室、超淨操作臺或空氣流動較小的清潔環境中，進行接種或其他不可避免的敞開作業，防止不需要的微生物侵入作業系統。